TMB是一种常用的生色底物,被广泛应用于比色分析中。TMB的化学式为C16H20N2O,其核心结构是联苯胺,并在其两侧各有一个甲基基团。TMB在碱性条件下,可以被氧化成蓝色三聚体,从而产生明显的吸收峰,可被光谱仪检测到。
TMB的生色原理是基于其氧化还原反应特性。在比色分析中,TMB被添加到反应体系中,当受检样品中存在目标分子时,目标分子会与检测抗体结合形成免疫复合物。该复合物会被添加的辣根过氧化酶(HRP)催化氧化产生过氧化物,过氧化物再催化TMB的氧化,产生显色反应。TMB的氧化反应需要一定的激活能,这可以通过加入过氧化氢或其他氧化剂来实现。
TMB具有以下优点:1)产生强烈的吸收峰,使得检测灵敏度高;2)稳定性好,不易受环境影响;3)相对较便宜,易于大规模生产。因此,TMB被广泛使用于生物分析、医学诊断和药物研发等领域。
总之,TMB作为比色分析中的生色底物,其原理是基于氧化还原反应,通过与目标分子免疫复合物产生的过氧化物催化TMB的氧化反应,从而产生明显的吸收峰。TMB具有稳定性好、灵敏度高、成本较低等优点,是一种常用的生色底物。