中温淀粉酶是一种在中温环境下具有作用的酶类物质。测定其活力是了解其作用机理的重要手段。下面将介绍一种测定中温淀粉酶活力的方法。
实验中需要准备的试剂有:淀粉溶液、甲醇、酵母浸出液、异丙醇-甲醇混合液、pH 6.8磷酸缓冲液和稀盐酸溶液。
首先,将淀粉溶液和磷酸缓冲液混合,制备出一定浓度的淀粉酶底物。然后,将酵母浸出液和pH 6.8磷酸缓冲液混合,制备出一定浓度的酶液。
接着,将一定量的淀粉酶底物加入试管中,并加入一定量的酶液。将试管放入温水槽中,在中温环境下反应一定时间后,加入甲醇停止反应。
然后,将试管中的液体转移到另一个容器中,加入异丙醇-甲醇混合液,并用稀盐酸溶液滴定。滴定时,异丙醇-甲醇混合液会将淀粉酶反应生成的葡萄糖转化为甲醇,滴定时加入的稀盐酸会将甲醇转化为HCl,从而使pH值下降,直到滴定指示剂变色。记录滴定所用的稀盐酸滴定液的体积,即可计算出淀粉酶反应产生的葡萄糖量,从而计算出中温淀粉酶的活力。
综上所述,测定中温淀粉酶活力的方法是一种简单而有效的实验方法,可以用来研究中温淀粉酶的作用机理和性质。